No
segundo ensaio com o fígado picado, ouve reação de forma maior em checagem com
o material inteiro, devido a ampliação da superfície de contato quando o mesmo
estava cortado.
No terceiro ensaio com o fígado macerado,
foi observado que, dentre todos os demais ensaios foi o que obteve uma maior
reação, porque ocorreu a quebra das células, fazendo assim a extração do
material celular. Conclui-se que o resultado dos três ensaios com material
biológico foi de caráter positivo, pois foi identificada a presença da
atividade QUESTIONÁRIO DA
AULA PRÁTICA
QUESTÃO
01
Na prática, qual foi o fenômeno
observado com a finalidade de avaliar a atividade da catalase? Como funciona?
A
catalase também pode ser chamada de hidroperoxidase. Trata-se de uma enzima
intracelular capaz de decompor o peróxido de hidrogênio. A enzima que gera a
catalase pode ser encontrada em animais, plantas e no citoplasma de
procariontes.
Nesse
processo, o peróxido de hidrogênio, produto gerado pelo metabolismo celular em
organismos expostos ao oxigênio atmosférico, tem de ser rapidamente convertido
numa substância inócua. Assim, a catalase destrói as moléculas de peróxido de
hidrogênio, tornando-a importante para a desintoxicação.
Pela
catalase a decomposição acontece em até 200 mil reações por segundo, formando
bolhas de oxigênio puro.
Na
prática foram observados três ensaios diferentes, no primeiro ensaio o fígado
inteiro passou por uma reação maior devido conter em sua composição uma grande
quantidade de catalase.
da catalase nos mesmos.
Questão
02
Considerando a equação E + S ⇌ ES → E + P,
explique de que forma a concentração da enzima influencia na atividade
enzimática.
As enzimas são proteínas
especializadas em catalisar reações biológicas, ou seja aumentam a velocidade
de uma reação química sem interferir no processo. Elas estão associadas a
biomoléculas, devido as suas extraordinária especificidade e poder catalítico.
Como as enzimas são catalisadores
, eles não são alterados pelas reações que exercem. O substrato (s), no
entanto, é / são convertidas em produto (s). Aqui, o peróxido de hidrogénio é
convertido em água e oxigénio gasoso.
Enquanto que os primeiros
(ligação) e terceiro passos (desligamento) são, em geral, reversível , a etapa
de média pode ser irreversível (como no renina e catalase reações acima
indicadas) ou reversível (por exemplo, muitas reações na glicólise via
metabólica).
Ao aumentar o substrato de
concentração, a taxa de reação vai aumentar devido à probabilidade de que a
série de complexos enzima-substrato irá aumentar, o que ocorre até que a enzima
torna-se a concentração de factor limitativo .
No organismo,
existem distintos tipos enzimáticos, reguladores das diversas vias metabólicas,
ampliando-se por todo o corpo humano, no entanto em pequenas quantidades.
Questão
03
Na primeira parte da prática, foi
administrada a mesma quantidade de água oxigenada em tubos de ensaio contendo
quantidades aproximadamente iguais de fígado (tecido rico em peroxidase). No
entanto o tecido hepático foi utilizado em três níveis de fragmentação
diferentes: 1. único bloco; 2. pequenos fragmentos; 3. extrato macerado.
Comparando o resultado obtido nas
três amostras de fígado, o que foi observado quanto à velocidade da reação?
Justifique.
Através da observação das reações ocorridas nos
tubos com fígado fresco e H2O2 e fígado
fresco triturado, conclui-se que as células do fígado possuem uma enzima
(catalase) que desdobra o peróxido de hidrogênio (H2O2), sendo os
produtos da reação água (H2O) e oxigênio (O2), a
libertação de oxigênio foi testada a partir da colocação de um fosforo em brasa
na boca do tubo.
No entanto a reação foi maior e mais rápida no tubo
com fígado fresco triturado devido ao fato do fígado ter sido esmagado. No tubo
com fígado e H2O2, só as
enzimas das células superficiais da amostra de fígado catalisaram a reação. No
tubo com fígado triturado ocorreu o extrato macerado, esmagando algumas células
que libertaram enzimas, e aumentando a superfície de contato. Assim, devido à
libertação das enzimas e o aumento da superfície de contato, aumentou a rapidez
da reação, já que um maior número de enzimas esteve em contato com o substrato
e, portanto, a catalisar a reação.
Nos outros experimentos colocou-se meia porção do
conteúdo de fígado fresco triturado (substrato já catalisado), e acrescentou-se
mais uma porção de fígado, ou seja, aumentaram-se as enzimas. Nenhuma reação
foi registrada, pois todo o substrato já tinha sido catalisado.
Na terceira prática com material macerado (fígado),
foi notório que o fígado em fragmentos obteve uma reação maior, pois houve a
quebra das células e ocorreu a extração do material celular, onde foi possível
identificar à presença da atividade da catalase nos mesmos.
Questão
04
O extrato de fígado macerado foi
exposto a quatro condições diferentes de temperatura: 0ºC, 25ºC, 40ºC e 100ºC,
sendo este último provocado pela fervura do extrato pela exposição à chama. De
que forma essas variações de temperatura influenciaram na velocidade
enzimática? Justifique.
De acordo com a observação das
experiências realizadas, conclui-se que a temperatura interfere com a atividade
enzimática. Em qualquer reação enzimática, a velocidade da reação aumenta com a
temperatura até um determinado valor, a partir do qual diminui até se anular.
Com esta atividade laboratorial
podemos inferir que dois fatores que condicionam a atividade enzimática são a
temperatura e o pH.
As temperaturas baixas (no caso do fígado congelado), bem
como as temperaturas elevadas (no caso do fígado cozido), influenciam a
atividade de enzimas como a catalase, inibindo-as de atuarem sobre o amido.
Quando as enzimas são sujeitas a temperaturas muito baixas, a inativação é
reversível (após o tubo 4 ser retirado do banho-maria verificámos que deu-se
reação). Com relação às enzimas que são submetidas a temperaturas elevadas
conclui-se que a sua inativação é irreversível (após se retirar o tubo 3 do
banho-maria notámos que não se processou nenhuma reação).
O PH também influencia a atuação das enzimas sobre o
substrato. Conforme verificado, relativamente à atuação da catalase, o PH muito
baixo (solução ácida, neste caso, o ácido clorídrico) e o ph com valores muito
elevados (base, neste caso, o hidróxido de sódio) inibem a atuação desta
enzima.
Questão
05
O macerado de fígado foi exposto
a três condições de pH diferentes: 1. pH menor que 7,0 (ácido); 2. pH igual a
7,0 (neutro); 3. pH maior a 7,0 (alcalino). A observação dos resultados reforça
que a enzima possui um pH ótimo. Em qual condição de pH a catalase obteve
melhor atividade? De que forma o pH afeta a atividade da enzima?
A temperatura é um fator importante na atividade das enzimas. Dentro de
certos limites, a velocidade de uma reação enzimática aumenta com o aumento da
temperatura. Entretanto, a partir de uma determinada temperatura, a velocidade
da reação diminui bruscamente.
A enzima, por ser um tipo de protéina, apresenta tanto tempratura como
pH ótimo para funcionar. Em altas temperaturas e pH alterado são desnaturadas.
O aumento de temperatura provoca maior agitação das moléculas e,
portanto, maiores possibilidades de elas se chocarem para reagir. Porém, se for
ultrapassada certa temperatura, a agitação das moléculas se torna tão intensa
que as ligações que estabilizam a estrutura espacial da enzima se rompem e ela
se desnatura.
A condição de pH que catalase obteve
melhor atividade foi a que continha o fígado macerado e pH maior que 7,0
(alcalino).
Conclui-se que cada enzima tem o
seu pH ótimo de atuação e que as variações bruscas de pH são fatores que muitas
vezes condicionam a atividade das enzimas.